藤田 基

1.ラット前脳虚血再灌流モデルにおけるO2－・の測定<br>【対象】Wistarラット（250-350g）<br>【方法】ラットを麻酔下に気管切開後人工呼吸管理とし、大腿動静脈にカニュレーションする。<br>O2-・センサーを総頚静脈の枝から挿入し先端を総頚静脈内に留置する。<br> Smith法の変法により、前脳虚血を20分間行い、その後再灌流して60分後までO2－・を測定する。<br> 同時に右脳線条体レベルに微小灌流を行い、20分毎に検体を採取する。<br> 灌流液中の一酸化窒素酸化物（NO2，NO3）、アミノ酸、脳組織中のNF-kBを測定し、O2－・電極によるラジカル測定値との相関を評価する。<br> また、確認のために再灌流後O2－・上昇を確認した後に、O2－・スカベンジャーであるsuperoxide dismutase (SOD)を投与し、O2－・の変化を測定する。<br> <br>2.ラットエンドトキシン血症モデルにおけるO2－・の測定<br>【対象】Wistarラット（250-350g）<br>【方法】ラットを麻酔下に気管切開後人工呼吸管理とし、大腿動静脈にカニュレーションする。<br>O2-・センサーを総頚静脈から挿入し先端を上大静脈内に留置する。<br> エンドトキシン（LPS 3mg/kg）を静脈内投与し、6時間後までO2－・を測定する。<br> 1時間毎に採血を行い、白血球数を算定し分画を調べるとともに、血清を保存しておく。<br> LPS投与6時間後に肺組織を灌流した後に、肺胞洗浄液を採取・凍結保存し、肺組織も凍結保存する。<br> 血清中、肺胞洗浄液中の血管内皮傷害マーカー（トロンボモジュリン、t-PA/PAI-1複合体、ICAM-1、VCAM-1、E-Selectin）を測定し、電極によるラジカル測定値との相関を評価する。 <br> また、確認のためにLPS投与後O2－・上昇を確認した後に、O2－・スカベンジャーであるsuperoxide dismutase (SOD)を投与し、O2－・の変化を測定する。<br>