流入下水を対象とした同時亜硝酸生成・アナモックスＭＢＢＲにて、立上げ実験（実験Ⅰ）を行った。さらに、硝酸が生成する状態から、亜硝酸蓄積がなされる状態に転換させることを試みた（実験Ⅱ）。亜硝酸蓄積のために、ＡＯＢの酸素半飽和定数がＮＯＢのそれよりも小さいという報告を基に、ＤＯ濃度を低く抑えた。低ＤＯ条件が続くとニトロスピラの酸素親和性が増して増殖するとの研究報告があり、本研究でも同様の現象がみられたが、実験Ⅰでは、運転開始後２００日以上亜硝酸の蓄積がなされた。実験Ⅱでは、４０～６０日後に亜硝酸の蓄積が始まり、その状態が５０日間程度継続した。