本研究では、腎尿細管間質病変の形成に関与していると考えられ、疾患活動期に尿細管上皮細胞に発現誘導されるオステオポンチンに注目し、同遺伝子の腎尿細管上皮細胞特異的な発現制御領域の検討をする。段階的に欠失を加えたオステオポンチン5'上流域にluciferase cDNAを連結したreporter gene constructを作成し、lipofectin法を用いたtransient transfectionにより、マウス近位尿細管上皮細胞(mPTEC)における転写活性の測定を行った。Transfectionにあたってはpromega社のTransFast Transfection Reagentを用いた。また、OPN発現を認めるその他の培養細胞、繊維芽細胞(3T3)とリンパ球/単球(RAW264)を用いて、同様の測定を行うことで、promoter活性の尿細管上皮細胞特異性について検討を加えた。また、活性化した尿細管での発現誘導の変化を検討する目的でtransforming growth factor(TGF)-β1刺激をもちいた。測定にはpromega社のDual-Luciferase Reporter Assay Systemを使用した。結果、検討したいずれの細胞でもcDNA : TransFast比は5μg:20μlで最も導入効率がよかった。mPTECでは刺激の有無に関わらず...