2011年 - 2012年
変異型SYCP3が相同染色体分配に与えるインパクトと習慣流産
文部科学省 科学研究費補助金(特定領域研究, 特定領域研究) 特定領域研究, 特定領域研究
- 課題番号
- 23013019
- 体系的課題番号
- JP23013019
- 担当区分
- 研究代表者
- 配分額
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- (総額)
- 6,400,000円
- (直接経費)
- 6,400,000円
- (間接経費)
- 0円
- 資金種別
- 競争的資金
わたしたちは、異数性による流産を繰り返していると思われる習慣流産の3名の患者で、第1減数分裂時の相同染色体の対合に関与するシナプトネマ複合体の蛋白をコードするSYCP3遺伝子の変異を同定した。これらの変異はすべてスプライシング部位の変異で、第8イントロンの残存、もしくは、第8エクソンのスキップをきたし、C末端の変異型SYCP蛋白を産生する。これまでの研究で、これらのC末端の変異蛋白が優性阻害効果によって、正常のSYCP3蛋白のファイバー形成を阻害することを、細胞株を用いた実験で証明している。しかし、実際の減数分裂時の卵細胞における変異型SYCP3蛋白の挙動、染色体分配に対する影響に関しては未解明である。そこで、本研究では、これら変異型SYCP3蛋白をマウスの卵細胞に強制発現させ、減数分裂細胞レベルでの異常の検出を試み、習慣流産の発症メカニズムに迫ることを目的としている。本年度は、マウス卵巣の器官培養の実験系を確立し、培養条件などの至適化に成功した。また、GFP遺伝子や正常SYCP3蛋白の発現ベクターを電気穿孔法により導入すること、ユビキタスプロモーターや減数分裂前期特異的プロモーターのもとに発現させること、タグの抗体を用いて発現蛋白を内因性蛋白と区別して検出することに成功し、実験系を確立することができた。強制発現させた正常SYCP3蛋白は染色体の軸上に同定され、内因性のSYC...
- リンク情報
- ID情報
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- 課題番号 : 23013019
- 体系的課題番号 : JP23013019