MISC

2013年8月20日

ブタ線維芽細胞増殖因子4タンパク質の生産およびPEF SV40細胞の細胞増殖に及ぼす影響

J Reprod Dev
  • 菅原彩子
  • 伊藤俊彦
  • 鈴木人志
  • 高橋利清
  • 小西潤一
  • 佐藤梓織
  • 佐藤由貴
  • 春日和
  • 小嶋郁夫
  • 福田智一
  • 小林正之
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Suppl Japanese Issue
開始ページ
J116
終了ページ
j116
記述言語
日本語
掲載種別
DOI
10.14882/jrds.106.0.P-29.0
出版者・発行元
(一社)日本繁殖生物学会

【目的】マウスの胚発生において,線維芽細胞増殖因子4(FGF4)は胎盤形成に関与する,重要な細胞増殖因子である。しかし,主要な産業動物であるブタの<i>FGF4</i>構造遺伝子塩基配列(GenBank XM_003122418)はドラフトシークエンスであるために誤りが存在する可能性が否定できない。そこで本研究では,品種が明らかなブタに由来する<i>FGF4</i>構造遺伝子の全塩基配列を決定した。また,大腸菌によりブタFGF4タンパク質を生産し,細胞増殖促進活性を検討した。【材料および方法】ランドレース種(2頭),デュロック種(4頭)の白血球からゲノムDNAを調製し,<i>FGF4</i>構造遺伝子の全塩基配列を決定した。決定した配列情報に基づき,N末端側にHisタグを付加し,かつ,分泌シグナルペプチドを除去した成熟型ブタFGF4(HispFGF4)を大腸菌において発現させ,ヘパリンカラムクロマトグラフィーにより精製した。次に,HispFGF4によるブタ胎仔線維芽細胞株PEF SV40細胞の増殖促進活性を検討した。さらに,FGF受容体活性の阻害剤(PD173074)を用いて,HispFGF4の作用経路を検討した。【結果および考察】ランドレース種,デュロック種に由来する<i>FGF4</i>構造遺伝子の塩基配列と,GenBank登録配列(XM_003122418)を比較したところ,サイレント変異は認められたものの,アミノ酸配列は完全に一致した。大腸菌により,推定した一次構造に基づいたHispFGF4を発現することができた。ヘパリンカラムクロマトグラフィーにより分画すると,0.92 M NaClにより溶出された。精製したHispFGF4の細胞増殖促進活性を検討したところ,PEF SV40細胞の増殖が有意(P<0.05)に促進された。PD173074を添加すると,HispFGF4による細胞増殖は有意(P<0.01)に抑制された。以上の結果より,生物活性を有するHispFGF4を生産することができたことが示された。

リンク情報
DOI
https://doi.org/10.14882/jrds.106.0.P-29.0
J-GLOBAL
https://jglobal.jst.go.jp/detail?JGLOBAL_ID=201302293474119485
CiNii Articles
http://ci.nii.ac.jp/naid/130005051156
URL
http://jglobal.jst.go.jp/public/201302293474119485
ID情報
  • DOI : 10.14882/jrds.106.0.P-29.0
  • ISSN : 0916-8818
  • eISSN : 1348-4400
  • 医中誌Web ID : 2014046981
  • J-Global ID : 201302293474119485
  • CiNii Articles ID : 130005051156
  • identifiers.cinii_nr_id : 9000283894585

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