本研究はヒト特異的mtDNA塩基配列に基づいたprimerを設計し、従来から法医学分野で個人識別に用いられているmtDNA高変異領域(D-loop)の各種primerとを組み合わせたmultiplex-PCR法を行うことで、検査試料の人獣鑑別と固人識別を同時に実施しようとするものである。先ず、コンピュータデータベース上で、ヒト及び霊長類のmtDNAの全長を比較して、ヒトに特異的なmtDNA配列を検索し、数種類のprimerを設定した。そのうち、NADH dehydrogenaseサブユニットのND4領域に設定したprimerにおいて、ヒトDNAのみを増幅する高い特異性を認めた。そこでこのNDA primerとD-loop領域の4組のprimer (HV1: L15997-H16236,L16159-H16401,HV2: L29-H285,L172-H408)とをそれぞれ組み合わせたmultiplex-PCR増幅を行った。その結果、ヒト試料では何れのprimerの組み合わせであっても、電気泳動上、明瞭な2本のバンドが検出され、全く増幅産物を認めない、或いは非特異的な増幅産物が検出される動物試料とは、明確に鑑別することが可能であった。またヒトの血液・毛髪・爪のDNAを試料としたmultiplex-PCR増幅産物については、D-loop領域のダイレクトシーケンス解析が可能であった...