2000年
ポリアクリルアミドゲル電気泳動後のアルカリ性ホスファターゼ活性検出におけるグリシン泳動緩衝液中の亜鉛の効果
生物物理化学
- ,
- 巻
- 44
- 号
- 1
- 開始ページ
- 15
- 終了ページ
- 19
- 記述言語
- 日本語
- 掲載種別
- DOI
- 10.2198/sbk.44.15
- 出版者・発行元
- Japanese Electrophoresis Society
グリシンを用いた非還元型PAGE後のゲル内ALP活性を高感度に検出するために, グリシンおよび亜鉛の影響を活性染色で調べた. 192mMグリシンを用いた電気泳動後のゲル内ALP活性は, ホウ酸を用いた時の半分に減少した. これに対して, グリシン緩衝液にZn2+を事前添加すると, 電気泳動後の酵素活性は亜鉛の濃度に依存して増加し, 1mMで最大となり, ホウ酸を用いた場合と同等かそれ以上になった. しかし, 泳動試料中あるいは酵素活性染色液中にZn2+を添加しても再活性化は起こらなかった. また蛋白質に結合した65Znはグリシンを用いた電気泳動で遊離し, ゲル内を陽極に移動した. グリシンの錯体形成能力は, 200mMグリシンに対し0.1mM以上のZn2+で消失することが, ECBTを用いた実験で明らかになった.
- リンク情報
- ID情報
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- DOI : 10.2198/sbk.44.15
- ISSN : 0031-9082
- ISSN : 1349-9785
- CiNii Articles ID : 130003607204