共同研究・競争的資金等の研究課題

1989年 - 1990年

温度感受性変異株を用いた酵母の蛋白質分泌機構の解析

文部科学省  科学研究費補助金(一般研究(C))  一般研究(C)

課題番号
01560115
体系的課題番号
JP01560115
担当区分
研究代表者
配分額
(総額)
1,700,000円
(直接経費)
1,700,000円
(間接経費)
0円
資金種別
競争的資金

我々の分離した酵母S.cerevisiaeの温度感受性変異uso1は、蛋白分泌における小胞体ーゴルジ体間の輸送に欠損をもち、制限温度下で分泌蛋白及び液胞蛋白質が小胞体に蓄積するとともに小胞体及び核膜の変形、異常な繊維束の蓄積などの形態学的変化をおこす。変異を相補する遺伝子をクロ-ン化後、遺伝解析よりサプレッサ-遺伝子ではなく真の野生型USO1遺伝子であることを確認し、遺伝子破壊によりこれが酵母の生育に必須であること及びパルスフィ-ルド電気泳動より第IV染色体に存在することを明らかにした。5937塩基対の塩基配列を決定した結果、273番のATGに始まり5607番のTGAで終る1790アミノ酸のopen reading frameが存在し、これがUso1遺伝子産物であると推定された。この蛋白は全体的に親水性であり、分泌シグナル配列や膜貫通配列にみられるような疎水性アミノ酸の連続部分はない。468番から20アミノ酸と1771番から15アミノ酸の部分は酸性アミノ酸に富み、前者にはカルシウム結合蛋白の共通配列が含まれている。また750番目から後半の配列はcoiled coilとなるαヘリックスを形成しうる特徴をもち、これによりUso1蛋白質は二量体を形成して機能していると予想される。アミノ酸36ー571番及び1128ー1790番を含む融合蛋白質を大腸菌で生産させ、これによりマウス及びウ...

リンク情報
URL
http://kaken.nii.ac.jp/d/p/01560115.ja.html
KAKEN
https://kaken.nii.ac.jp/grant/KAKENHI-PROJECT-01560115
ID情報
  • 課題番号 : 01560115
  • 体系的課題番号 : JP01560115