MISC

2005年

化学合成独立栄養細菌Acidithiobacillus thiooxidans 由来アコニターゼの遺伝子解析と大腸菌での発現

岡山大学農学部学術報告
  • 金原陽平
  • ,
  • 田村 隆
  • ,
  • 徳田千束
  • ,
  • 中村淳雄
  • ,
  • 松川寛和
  • ,
  • 稲垣賢二

94
開始ページ
1
終了ページ
7
記述言語
日本語
掲載種別
出版者・発行元
岡山大學農學部

Acidihiobacillus hiooxidans由来アコニターゼ遺伝子を大腸菌中にクローニングし、発現させ、精製及び性質検討を行った。A. hiooxidansアコニターゼはEscherichia coli JM109株で発現させ、活性が無細胞抽出液で確認された。646アミノ酸から成っており、イソクエン酸脱水素酵素遺伝子(icd)の上流に位置していた。またブタ心筋由来アコニターゼと大腸菌アコニターゼA型と高いアミノ酸配列相同性があり、ブタ心筋アコニターゼで触媒反応、基質の結合に関与するとされている27アミノ酸のうち25アミノ酸の保存が確認された。A. hiooxidansアコニターゼはDEAE-oyopearl 650M等により精製された。精製酵素は至適pH7.5、至適温度60℃であった。また40℃で1時間インキュベートを行った後にも、活性の低下は見受けられなかった。pH6.0-8.0で1時間インキュベートした後も、100%の活性を維持していた。更に本酵素は、分子量66000のモノマー酵素であることが明らかになった。なお、本論文中に記載したA. hiooxidansのアコニターゼ遺伝子を含む塩基配列はDDBJデータベースに登録されており、アクセション番号AB196983で検策できる。

リンク情報
CiNii Articles
http://ci.nii.ac.jp/naid/40006625148
CiNii Books
http://ci.nii.ac.jp/ncid/AN00033029
URL
http://id.ndl.go.jp/bib/7243474
URL
http://agriknowledge.affrc.go.jp/RN/2010710742 本文へのリンクあり
ID情報
  • ISSN : 0474-0254
  • CiNii Articles ID : 40006625148
  • CiNii Books ID : AN00033029

エクスポート
BibTeX RIS