2005年
化学合成独立栄養細菌Acidithiobacillus thiooxidans 由来アコニターゼの遺伝子解析と大腸菌での発現
岡山大学農学部学術報告
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- 巻
- 94
- 号
- 開始ページ
- 1
- 終了ページ
- 7
- 記述言語
- 日本語
- 掲載種別
- 出版者・発行元
- 岡山大學農學部
Acidihiobacillus hiooxidans由来アコニターゼ遺伝子を大腸菌中にクローニングし、発現させ、精製及び性質検討を行った。A. hiooxidansアコニターゼはEscherichia coli JM109株で発現させ、活性が無細胞抽出液で確認された。646アミノ酸から成っており、イソクエン酸脱水素酵素遺伝子(icd)の上流に位置していた。またブタ心筋由来アコニターゼと大腸菌アコニターゼA型と高いアミノ酸配列相同性があり、ブタ心筋アコニターゼで触媒反応、基質の結合に関与するとされている27アミノ酸のうち25アミノ酸の保存が確認された。A. hiooxidansアコニターゼはDEAE-oyopearl 650M等により精製された。精製酵素は至適pH7.5、至適温度60℃であった。また40℃で1時間インキュベートを行った後にも、活性の低下は見受けられなかった。pH6.0-8.0で1時間インキュベートした後も、100%の活性を維持していた。更に本酵素は、分子量66000のモノマー酵素であることが明らかになった。なお、本論文中に記載したA. hiooxidansのアコニターゼ遺伝子を含む塩基配列はDDBJデータベースに登録されており、アクセション番号AB196983で検策できる。
- リンク情報
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- CiNii Articles
- http://ci.nii.ac.jp/naid/40006625148
- CiNii Books
- http://ci.nii.ac.jp/ncid/AN00033029
- URL
- http://id.ndl.go.jp/bib/7243474
- URL
- http://agriknowledge.affrc.go.jp/RN/2010710742 本文へのリンクあり
- ID情報
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- ISSN : 0474-0254
- CiNii Articles ID : 40006625148
- CiNii Books ID : AN00033029