本年度は、我々が作製したCyclin-dependent kinase-like 5 (CDKL5) floxedマウスを、CAG-Creマウス、及びTau-Creマウスと交配し、全身型Cdk15ノックアウト(KO)マウス、及び神経細胞特異的Cdk15 KOマウスを作出した。全身型KOマウス、神経細胞特異的KOマウス、及び野生型の同腹子を、発達ステージ毎に全身及び脳切片の免疫組織学的染色により、脳形態、皮質層構造、海馬構築、軸索走行につき比較解析を行った。海馬神経細胞分散培養により、軸索・樹状突起、棘突起の形態・数の詳細な解析を行った。これまでの解析結果から、Cdk15 KOマウス神経細胞樹状突起の棘密度に変化が認められた。また、yeast two-hybridスクリーニングを用いたCdk15相互作用分子の網羅的探索により、21の相互作用因子候補を得た。各候補因子を、マウス脳溶解物を用いた共免疫沈降、GST標識組換え蛋白を用いたpull-downアッセイ法で確認した。現在有意な因子の抽出を進めている。本年度の研究成果から、Cdk15の樹状突起棘形成制御に関する機能が示され、この機能不全が、CDKL5遺伝子変異に伴う神経発達障害の分子基盤であるこが示唆された。また、相互作用蛋白解析により、神経細胞骨格蛋白、イオンチャンネル分子との相互作用が示され、CDKL5変異による病態にこれ...