2002年 - 2003年
新規ABA非感受性変異体slh1の表現型解析と原因遺伝子のクローニング
文部科学省 科学研究費補助金 若手研究(B) 若手研究(B)
- 課題番号
- 14740449
- 体系的課題番号
- JP14740449
- 担当区分
- 研究代表者
- 配分額
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- (総額)
- 3,500,000円
- (直接経費)
- 3,500,000円
- (間接経費)
- 0円
- 資金種別
- 競争的資金
Ds端配列データベースを利用して、slh1のDs挿入遺伝子のノックアウトalleleを2ライン単離できたが、これらは生育阻害を示さなかった。また、cDNA導入によって表現型が相補されなかったことから、Ds挿入はslh1の原因遺伝子でないことが判明した。そこで、ポジショナルクローニングを行った。その結果、slh1は、Dsを含む83.6kbp内にマッピングされ、これはDsのハイグロマイシン耐性と表現型の強い連鎖と一致していた。領域内の塩基配列解析により、青枯病菌Ralstonia solanasearumへの耐性を与えるRRS1-R遺伝子のWRKYドメイン内に3塩基(TTA)の挿入変異を発見した。RRS1-Rは典型的なR-geneにWRKYドメインが融合した遺伝子で、塩基挿入はDs転移の際に生じたフットプリントと考えられるが、この変異によってWRKYの保存領域にロイシンの挿入が起こり、DNA結合能の喪失が予想された。現在相補性試験を行っている。slh1表現型はNahGの導入によって相補されず、病原体抵抗性遺伝子発現の抑圧も確認されなかった。またnpr1-5との二重破壊株の解析においても、表現型が抑圧されなかったことから、slh1は、サリチル酸とNPR1に非依存的な経路が活性化している事がわかった。湿度低下における気孔閉鎖とABA誘導性遺伝子の発現は正常であった。本研究課題の遂行に...
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- ID情報
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- 課題番号 : 14740449
- 体系的課題番号 : JP14740449