すでに解析を進めているCinobufaginによる白血病細胞株に対する抑制効果に関して、詳細なる解析を行った。FAB分類M２に属する、HL60、Kasumi-1に対してCinobufagin処理を行い、RNA-seq DATAを用い、GSEA解析を行った結果、薬剤処理により発現が低下した遺伝子群に関してはMYC_TARGETS_V2とV1にトップヒットをみとめた。また上昇した遺伝子群はTNFA_SIGNALING_VIA_NFKB, APOPTOSIS, TGF_BETA_SIGNALINGという白血病細胞を細胞死に導くものであった。また、H3K27ac抗体によるChIP-seqで解析したところ上昇した遺伝子群のH3K27ac化レベルは薬剤処理により上昇をみとめた。薬剤処理によりH3K27ac化レベルが上昇したlocusにおいてde novo Motif解析を行ったところ、AP-1とRUNX1のMotifが有意であり、これらの転写因子の関与が示唆された。また、低下したc-Myc関連遺伝子群はH3K27ac化レベルの変化はみとめられなかった。これらc-Mycシグナルの抑制を解したアポトーシス誘導に関して、論文化を行った(1)。
Cinobufaginはジギタリスなどの強心ステロイドと同じくNa/K ATPaseを阻害することが知られているが、c-Mycの抑制を介した抗がん作用が認められた。このことは難治疾患である急性骨髄性白血病の治療に関して、新たな知見であると思われた。
1) Yoshiro Hirasaki et al, Cinobufagin inhibits proliferation of acute myeloid leukaemia cells by repressing c-Myc pathway-associated genes, CHEMICO-BIOLOGICAL INTERACTION, in press